PCR實(shí)驗(yàn)室的分區(qū)
1.分子生物學(xué)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室
《臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室基本設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)》1.1條的要求，PCR實(shí)驗(yàn)室一般由試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)4個(gè)區(qū)域組成。如果采用實(shí)時(shí)熒光PCR法，則擴(kuò)增區(qū)和分析區(qū)可以合并為一個(gè)區(qū);如果采用全自動(dòng)化PCR分析儀，則標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)和分析區(qū)可以合并為一個(gè)區(qū)。
《醫(yī)療機(jī)構(gòu)新型冠狀病毒核酸檢測(cè)工作手冊(cè)（試行第二版）》中規(guī)定原則上開(kāi)展新冠病毒核酸檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)設(shè)置以下區(qū)域：試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增和產(chǎn)物分析區(qū)。這3個(gè)區(qū)域在物理空間上應(yīng)當(dāng)是完全相互獨(dú)立的，不能有空氣的直接相通。
2.制樣室
雖然在標(biāo)本制備區(qū)也可以簡(jiǎn)單制備樣品，面對(duì)復(fù)雜樣品和大量樣品時(shí)還是需要設(shè)有專門的制樣室，制樣室存在很高的生物安全風(fēng)險(xiǎn)和核酸污染風(fēng)險(xiǎn)。
3.廢棄物處理室
不當(dāng)?shù)膹U棄物處理也會(huì)給實(shí)驗(yàn)室?guī)?lái)巨大的生物安全和核酸污染的風(fēng)險(xiǎn)，因此需要對(duì)廢棄物處理室進(jìn)行經(jīng)常性的監(jiān)控。
PCR實(shí)驗(yàn)室的風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)點(diǎn)
按獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)室分為制樣室、試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增和產(chǎn)物分析區(qū)、廢棄物處理室。
按照采樣部位的類型分為表面、儀器、樣品、環(huán)境監(jiān)控和移液器。
風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)由低到高為一顆星★到三顆星★★★。
1.制樣室：
用于樣品的登記、制備和滅活等操作，生物安全風(fēng)險(xiǎn)最高，由于樣品未經(jīng)提取和擴(kuò)增，除了頻繁與樣品有接觸的移液器，其他部位核酸污染風(fēng)險(xiǎn)較低。
1-4監(jiān)測(cè)點(diǎn)采樣
5-8監(jiān)測(cè)點(diǎn)采樣
9-12監(jiān)測(cè)點(diǎn)采樣
2.試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)：
用于貯存試劑的制備、試劑的分裝和擴(kuò)增反應(yīng)混合液的制備，以及離心管、吸頭等消耗品的貯存和準(zhǔn)備。該區(qū)不直接與樣品接觸也無(wú)陽(yáng)性核酸，因此生物安全風(fēng)險(xiǎn)和核酸污染風(fēng)險(xiǎn)較低。
13-16監(jiān)測(cè)點(diǎn)采樣
17-22監(jiān)測(cè)點(diǎn)采樣
3.標(biāo)本制備區(qū)：
用于轉(zhuǎn)運(yùn)桶的開(kāi)啟，標(biāo)本的滅活（適用時(shí)），核酸提取及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管等。該區(qū)可能涉及樣品的處理和開(kāi)啟，生物安全風(fēng)險(xiǎn)為高，又進(jìn)行核酸的提取，核酸污染風(fēng)險(xiǎn)為中到高。
29監(jiān)測(cè)點(diǎn)采樣
4.擴(kuò)增和產(chǎn)物分析區(qū)：
用于核酸擴(kuò)增。該區(qū)不涉及樣品的處理生物安全風(fēng)險(xiǎn)較低，核酸擴(kuò)增主要在本區(qū)，核酸污染風(fēng)險(xiǎn)最高。
38監(jiān)測(cè)點(diǎn)采樣
5.廢棄物處理室：
用于樣品的高壓處理。該區(qū)涉及樣品的處理生物安全風(fēng)險(xiǎn)較高，核酸的擴(kuò)增產(chǎn)物建議按照醫(yī)療廢棄物處理，不建議進(jìn)行高壓，核酸污染風(fēng)險(xiǎn)較低。
43-44監(jiān)測(cè)點(diǎn)采樣
實(shí)施
本次列舉了44個(gè)監(jiān)測(cè)點(diǎn)，估計(jì)很多人看到了要問(wèn)，這么多點(diǎn)都需要做嗎？是的，都要做！我建議首先對(duì)自己的實(shí)驗(yàn)室做個(gè)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，可以按照風(fēng)險(xiǎn)由高到低做，也可以按同類樣品合樣監(jiān)測(cè)，也可以制定一個(gè)采樣計(jì)劃定期監(jiān)測(cè)。
總之每個(gè)實(shí)驗(yàn)室可以結(jié)合自己情況，制定自己的實(shí)施方案。對(duì)于檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室最大的風(fēng)險(xiǎn)就是忽視了風(fēng)險(xiǎn)。
